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维生素测定

微生物法测定维生素B12,要用优质培养基

来源:威正翔禹|缔一生物发布时间:2020-08-21阅读次数: 收藏

维生素B12,是人体必需维生素,在维持机体正常造血和神经功能健全中起到至关重要的作用。因此,对于婴幼儿配方乳品和营养补充食品中,测定维生素B12十分必要。


我国《GB 5413.14—2010食品安全国家标准 婴幼儿食品和乳品中维生素B12的测定》规定了采用莱士曼氏乳酸杆菌(ATCC 7830)测定维生素B12的整个流程。实际亦有多篇报道,肯定了微生物法的准确可靠,并且测定样品还包括肠内营养粉剂、多维元素片、维生素饮料以及含乳饮料等[1-4]。


微生物法的原理是,根据试验菌株对微生物B12的特异性和灵敏性,在含有除维生素B12以外所有营养的【测定培养基】中,加入标准曲线工作液以及未知待测样品溶液,根据微生物生长产生的透光率,对待测样本中微量的微生物B12进行测定。


其中,测量的准确度尤其依赖于维生素B12在一定浓度范围内与透光率呈现良好的线性关系。而是否呈良好的线性,又与所用的【测定培养基】有很大的关系。有机构采用了不同品牌的【维生素B12测定培养基】进行测定,发现两个国产品牌培养基的接种空白依然有生长,勉强可获得标准曲线,但线性结果不理解。而进口品牌的“标准曲线明显梯度正生长, 获得较理想的标准曲线, 线性结果较理想”[5]。


参考文献

1. 蒋孟虹,许苹,秦峰,刘浩,杨美成. 微生物法测定肠内营养粉剂中微量维生素B12的含量[J].食品安全质量检测学报,2016,7(3):893-897

2. 卢京光,裴琳,杨龙华.在线微生物浊度法测定多维元素片中微量维生素B12的含量[J].药物分析杂志,2011,031(009):1837-1839

3. 陈亚波,周敏,杨彤.微生物法测定维生素饮料中的维生素B12[J].浙江农业科学,2013,000(007):863-865

4. 林耀文,佘之蕴,李姣,苏妙仪,范安妮,张施敬,王力清.微生物法测定含乳饮料中维生素B12含量[J].饮料工业,2013,016(004):39-42

5. 陈绪华, 刘健, 江一飞. 不同测定培养基对维生素B12线性的影响[J]. 生物技术世界, 2013(04):53+131


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生产商HiMedia Laboratories是全球著名的微生物培养基供应商,

生产工艺均通过WHO-GMP、ISO9001、ISO13485认证,

【维生素B12测定培养基】在CE和FDA具有注册登记。

产品信息

中文:维生素B12测定用培养基

英文:Vitamin B12 Assay Medium

品牌:HiMedia®

规格:100G/瓶

货号:M036

储存温度:8℃下密闭保存,理想是放置于干燥器中。

质控

该产品出厂前经厂家严格检测,确保合格后方予放行。具体质控包括:

外观(粉末颜色、均一度、是否结块)

溶水后的培养基颜色和透明度

pH值(8.5% 水溶液,25℃)

培养反应(对莱士曼乳酸杆菌ATCC 7830 在35-37℃培养18-24小时)

生长试验(用美国药典维生素B12标准品,每管分别加入0.0,0.025,0.050,0.075,0.1,0.125,0.150和0.2ng,观察菌株的连续生长状况,在620nm测定吸光度)

(注:分别为对照,空白,标准品1,标准品3,标准品5)


优势

该产品不含痕量维生素B12,有效避免标准曲线偏移和本底过高,结果准确可靠。

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