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威正翔禹生物科普:关于胎牛血清知识问答(三)

来源:缔一生物发布时间:2021-07-30阅读次数: 收藏

胎牛血清是指怀孕5-8个月的母牛被屠宰后,发育未完全的胎牛心脏穿刺采血后,通过一系列工艺处理最终获得。此时胎牛血中含有特殊的生长发育因子,一旦胚胎发育完全这些因子自动消失。那么,面对如此珍贵的胎牛血清,实验人该如何防治黑点生成、如何储存使用血清呢?

1、 细胞培养中如何防止黑点生成?  

答:(1) 尽可能地减少血清冻融次数。

(2) 培养基无需37℃水浴。  

(3) 培养基保持最佳PH值7.0- 7.2。  

(4) 严格控制配制培养基的水质,容器定期刷洗。  

(5) 掌握细胞传代的最佳时机,细胞切勿生长过老。

2、如何储存使用血清?

答:储存条件:血清一般储存于-20℃,同时应避免反复冻融。购买大包装的血清后,需要分装成小包装,储存于-20℃,使用前融化。关于血清融化,我们推荐以三步来进行(详细可参阅《关于胎牛血清知识问答(一)》)。例如,500ml的胎牛血清,首先在室温条件下放置90min,然后再20℃水浴放置25min,最后在37℃水浴放置35分钟即可。

使用浓度:自从有了合成培养基,血清就是作为一种添加成分与合成培养基混合使用,使用浓度一般为5-20%,最常用是10%。过多血清容易使培养中的细胞发生变化,特别是一些二倍体的无限细胞系,迅速生长之后容易发生恶性转化。

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