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威正翔禹生物科普:关于胎牛血清知识问答(一)

来源:缔一生物发布时间:2021-07-30阅读次数: 收藏

科普:关于胎牛血清知识问答(一)

前面我们说过了如何鉴别胎牛血清的质量,但是关于如何保存胎牛血清,也是很多初次接触细胞培养的实验人比较关注的问题。今天,小编就为大家分享一下关于胎牛血清的一些常识。

1、 如何储存和解冻血清才不会使产品质量受损?  

答:血清推荐融化方法(三步法)



温度

100ml

500ml

1000ml

第一步

室温

35min

90min

100min

或15-20℃水浴

5min

18min

20min

第二步

20℃水浴

15min

25min

30min

第三步

37℃水浴

20min

35min

45min



但必须注意的是,融解过程中必须规则地摇晃均匀。长时间储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊。因此,推荐在-20℃以下储存血清,并避免反复冻融。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。

2、血清中包含絮状沉淀是什么,怎么处理?  

答:沉淀包含纤维蛋白和脂蛋白。这是正常特性,不会影响产品性质。要除去沉淀,离心血清(400g,1-2分钟)或者简单的让其沉淀在瓶子底部,将血清小心的转移到另一个无菌瓶里(一般不建议采用过滤的方法除去沉淀,因为沉淀会堵塞滤膜而无法过滤)。大多情况轻轻摇动沉淀并加热至37℃就会再溶解。所以,使用产品时要摇动并加热血清至37℃,沉淀会自然消失。

如何避免血清中产生沉淀?

答: 按如下操作可避免沉淀的产生:  

(1)解冻血清/分装冻存时,须规则摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。  

(2)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。  

(3)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。  

4、 培养基中添加了血清和抗生素后,可长期保存吗?  

答:一旦您在新鲜培养基中添加了血清和抗生素时,您应该在两到三周内使用它。因为一些抗生素和血清中的基本成分在解冻后就开始降解。

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